singlet oxygen(1O2)により、G:C->T:A transversionが多く発生する。
これは8-oxoguanineによるものと考えられる。また、1O2によりG:C->C:G
transversionも生じるが、この原因は不明だ。この変異はMutY、MutM欠損株に多いことが知られて
いる。また、MutY、MutM欠損株にγ線照射をするとG:C->C:Gが増加することも知られている。これ
らの場合、G:OGにMutYが作用しGを除去することによりG:C->C:Gが減少すると考えられている。しか
し、8-OGと対を形成する塩基はA、CでありG:OGの形成はあってもまれである。G:GOの形成機構として
は8-OGの酸化産物guanidinohydantoinによるものが挙げられる。
今回の結果ではMutMとMutYの欠損株よりも、MutY、MutM、UvrCの3つを欠損している株の方が G:C->C:Gが少なかった。また、この差異は傷害部位の位置によっても数倍異なっていた。UvrABC 修復系はヌクレオチド除去修復(nucleotide exision repair, NER)に関係する酵素であり、これ が8-OGを除去することにより変異が増加していると考えられる。
・1O2処理法
1O2処理にはNDPO2を用いた。50mM NDPO2とDNAを 1時間、37℃でincubateした。NDPO2は熱分解によりNDP(3,3'-(1,4-naphthylidene) dipropionate) と1O2に分解される。1O2の生成はNDPにより定量した。
≪文献≫
Nucleic Acids Research, 2001, Vol.29, No.13 2899-2903
DNA repair and sequence context affect 1O2-induced mutagenesis in bacteria
L. F. Agnez-Lima, R. L. Napolitano, R. P. P. Fuchs, P. Di Mascio, A. R. Muotri, C. F. M. Menck
今回の結果ではMutMとMutYの欠損株よりも、MutY、MutM、UvrCの3つを欠損している株の方が G:C->C:Gが少なかった。また、この差異は傷害部位の位置によっても数倍異なっていた。UvrABC 修復系はヌクレオチド除去修復(nucleotide exision repair, NER)に関係する酵素であり、これ が8-OGを除去することにより変異が増加していると考えられる。
|
WT ; Wild Type, 野生型(変異なし) fpg ; mutM xth ; exonuclease III |
・1O2処理法
1O2処理にはNDPO2を用いた。50mM NDPO2とDNAを 1時間、37℃でincubateした。NDPO2は熱分解によりNDP(3,3'-(1,4-naphthylidene) dipropionate) と1O2に分解される。1O2の生成はNDPにより定量した。
≪文献≫
Nucleic Acids Research, 2001, Vol.29, No.13 2899-2903
DNA repair and sequence context affect 1O2-induced mutagenesis in bacteria
L. F. Agnez-Lima, R. L. Napolitano, R. P. P. Fuchs, P. Di Mascio, A. R. Muotri, C. F. M. Menck
