１．フラスコにLB培地100mlを用意し菌を108cells/mlまで培養。
増やしぎた場合は形質転換率が悪くなるから注意。
２．25ccか50ccのファルコンチューブで4℃、6000rpm、5min遠心。以下氷中操作。
３．50mM CaCl2で懸濁。
LB培地100mlに対し40ml使用。
４．4℃、6000rpm、5min遠心。
５．50mM CaCl2 containing 15% glycerolで懸濁。
LB培地100mlに対し10ml使用。
６．4℃、6000rpm、5min遠心。
７．50mM CaCl2 containing 15% glycerolで懸濁。
LB培地100mlに対し2.5ml使用。
８．エッペンに100μlずつ分注。
９．液体窒素につける。
白くなればOk.
10．-80℃で保存。
増やしぎた場合は形質転換率が悪くなるから注意。
２．25ccか50ccのファルコンチューブで4℃、6000rpm、5min遠心。以下氷中操作。
３．50mM CaCl2で懸濁。
LB培地100mlに対し40ml使用。
４．4℃、6000rpm、5min遠心。
５．50mM CaCl2 containing 15% glycerolで懸濁。
LB培地100mlに対し10ml使用。
６．4℃、6000rpm、5min遠心。
７．50mM CaCl2 containing 15% glycerolで懸濁。
LB培地100mlに対し2.5ml使用。
８．エッペンに100μlずつ分注。
９．液体窒素につける。
白くなればOk.
10．-80℃で保存。
全工程は氷中操作。菌を培養するときにコンタミしてなければまぁ大丈夫。