１．コンピテントセルにplasmidを導入。コロニーを作らせる（形質転換参照）。
　　　
２．コロニーを白金耳でとり、別のプレートに引き伸ばす。
　　　クリーンベンチで行なう。
３．37℃、overnight incubation
　　　10時間程度。
４．現れたコロニー1つを爪楊枝で取り、試験管内のLB培地5mlに植菌。
　　　クリーンベンチで行なう。
５．37℃で1×10⁸cells/mlになるまでincubate。
　　　菌数に達しなくても濁りが出ればOk.
６．1.5リットルYT培地に5ml全部入れる。
　　　入れる10分ぐらい前から培地を37℃にしておくと育ちが速い。
７．37℃で1×10⁸cells/mlになるまでincubate。
　　　菌数に達したら1mlのサンプルをエッペンに取る。
８．IPTG 75mgを水に溶かしたものを入れ37℃でincubate。
　　　IPTGを50μg/mlの濃度にする。
　　　IPTGは冷蔵庫に保管し使う直前に溶かす。
９．IPTGを入れてから1,3,5時間後に1mlずつサンプルを取る。
　　　前に取ったサンプルとともに発現チェックに使う。
10．集菌
　　　遠心し上清を捨て菌体をサランラップでくるんで-20℃で冷凍保存。

---

　IPTG誘導による発現チェックをするだけであれば1.5リットルの培地を使う必要はない。５の作業で 試験管内に菌が増えた時点でIPTGを入れればいい。

　タンパク質によってはIPTGを加えるタイミングで発現量が大きく変わる。
　　　・IPTGを加えるときの菌数
　　　・IPTGを加えた後の時間を長く
　　　・培地組成を変える（YT培地ではなくLB培地を使ったり）
　　　・IPTGを入れなくても発現することも
　　　・プラスミドを変える。lac系やHisTag系で発現が増えることも
　などの条件を検討してみてもいい。