1.サランラップを机に敷く。
2.泳動用の乾いたガラス板をその上に置く。
エタノールで濡らしてキムワイプで拭くといいかも。
3.コームをガラスの上に置きガラスに接さないことを確認する。
ガラス面と1~2mm隙間が開くぐらいがベスト。
4.電子レンジで溶かしたゲル25ccをメスシリンダーに取りガラス板に垂らす。
溶かすときは突沸しないように注意。容器の蓋は緩める。
ゲルの表面張力でガラス板からこぼれない。
5.コームを上に載せ固まるのを待つ。
垂らし終わったらメスシリンダーはすぐに洗うこと。
6.泳動槽にRunning Bufferを入れる。
泳動槽の下に黒い紙を敷いておくとゲルが見やすい。
7.ゲルをガラス板ごと入れる。
ウェルがある方をマイナス(黒)側にする。
8.パラフィルムにDyeをとり、1μlのDNAサンプルと混合。ウェルへ入れる。
Dyeは×10を使うと見やすい。
9.60~70V(定電圧モード)で泳動。
10分後ぐらいに紫外線ランプで流れているか確認する。
100V以上でも構わないがバンドが乱れる。
10.専用の機械でゲルを見る。
機械の内部にラップを敷き、その上にガラスを除いたゲルを置く。
ethydium bromideは発ガン性物質なのでゲルや溶液を扱うときは手袋を使う。
2.泳動用の乾いたガラス板をその上に置く。
エタノールで濡らしてキムワイプで拭くといいかも。
3.コームをガラスの上に置きガラスに接さないことを確認する。
ガラス面と1~2mm隙間が開くぐらいがベスト。
4.電子レンジで溶かしたゲル25ccをメスシリンダーに取りガラス板に垂らす。
溶かすときは突沸しないように注意。容器の蓋は緩める。
ゲルの表面張力でガラス板からこぼれない。
5.コームを上に載せ固まるのを待つ。
垂らし終わったらメスシリンダーはすぐに洗うこと。
6.泳動槽にRunning Bufferを入れる。
泳動槽の下に黒い紙を敷いておくとゲルが見やすい。
7.ゲルをガラス板ごと入れる。
ウェルがある方をマイナス(黒)側にする。
8.パラフィルムにDyeをとり、1μlのDNAサンプルと混合。ウェルへ入れる。
Dyeは×10を使うと見やすい。
9.60~70V(定電圧モード)で泳動。
10分後ぐらいに紫外線ランプで流れているか確認する。
100V以上でも構わないがバンドが乱れる。
10.専用の機械でゲルを見る。
機械の内部にラップを敷き、その上にガラスを除いたゲルを置く。
【 TBE(Tris-borate EDTA)Buffer(×10)】 Tris 60.75g H3BO3 30.92g EDTA 3.73g H2O total 1000ml 【 Agarose Gel 】 agarose 0.7~1.5g 10mg/ml ethydium bromide 5.0μl Tris-borate Buffer(×5) 10ml H2O total 100ml 【 Running Buffer 】 10mg/ml ethydium bromide 5.0μl TBE Buffer(×5) 10ml H2O total 100ml 【 DNA Dye Solution 】 BTB 2.5mg glycerol 5.0ml 0.5M EDTA 0.2ml H2O total 100ml
ethydium bromideは発ガン性物質なのでゲルや溶液を扱うときは手袋を使う。







